9641项目回复-20241223
一.包含潮霉素的载体比对测序数据
1.从 NCBI 数据库中下载了一些包含潮霉素的载体序列,如下:
2.使用bowie2将测序 reads 比对至载体序列,并利用 Samtools 统计覆盖深度,如下:
3.绘图如下:
二.迭代延伸
1.使用bowtie2将测序数据mapping到目标序列(潮霉素序列)上,使用spades对mapping到的reads进行组装,组装结果作为下一次的目标序列,
重复进行此过程,截至12月23日分析时已进行了22次迭代延伸。
2.在bandage软件中打开第22次的组装结果,使用blast将潮霉素序列以及NCBI 下载的包含潮霉素的载体序列比对到组装结果,结果如下:
其中深棕色是提供的潮霉素,蓝色整体是ncbi上包含潮霉素的载体AB303069.1。
3.具体比对结果如下:(前861bp是延伸出的染色体序列)
三.比对
1.将组装结果的前861bp取出来,上传ncbi进行blast比对,结果如下:
与5号染色体完全匹配,与3号染色体只匹配100多bp。
2.使用mummer软件比对861bp和参考基因组,获得如下结果:
3.查看之前发送的结果,上述位置依旧还是chr5 上的 LOC_Os05g35594基因第二个外显子,如下:
上一次的”总结“部分: